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1.簡(jiǎn)介谷物和豆類是人類和動(dòng)物飲食的主要組成部分。半乳糖基蔗糖(棉籽糖、水蘇糖和毛蕊草糖)是許多谷物和豆類的主要成分,谷物豆類的抗?fàn)I養(yǎng)性通常與這類低聚糖的存在有關(guān)。半乳糖基蔗糖在上上部消化道不被水解,而在小腸下端,在細(xì)菌作用下被代謝,產(chǎn)生甲烷、氫和二氧化碳,易導(dǎo)致腸胃脹氣和腹瀉。因此,半乳糖基蔗糖是單胃動(dòng)物飲食的抑制因子。從豆類粉中提取半乳糖基蔗糖可以使用集中溶劑,通常為水和酒精的混合物。在提
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谷物和豆類是人類和動(dòng)物飲食的主要組成部分。半乳糖基蔗糖(棉籽糖、水蘇糖和毛蕊草糖)是許多谷物和豆類的主要成分,谷物豆類的抗?fàn)I養(yǎng)性通常與這類低聚糖的存在有關(guān)。半乳糖基蔗糖在上上部消化道不被水解,而在小腸下端,在細(xì)菌作用下被代謝,產(chǎn)生甲烷、氫和二氧化碳,易導(dǎo)致腸胃脹氣和腹瀉。因此,半乳糖基蔗糖是單胃動(dòng)物飲食的抑制因子。
從豆類粉中提取半乳糖基蔗糖可以使用集中溶劑,通常為水和酒精的混合物。在提取前將內(nèi)源性α-半乳糖苷酶和轉(zhuǎn)化酶滅活非常重要。
使用色譜法可以分離并定量檢測(cè)提取的半乳糖基蔗糖,但是這些方法通常為半定量方法。高效液相色譜法和低壓液相色譜法可以定量,但是消耗時(shí)間長(zhǎng),尤其是樣品提取方面。
棉籽糖、水蘇糖和毛蕊草糖可以被α-半乳糖苷酶水解為D-半乳糖和果糖。目前,市場(chǎng)上已經(jīng)有檢測(cè)棉籽糖的生化試劑盒。這些試劑盒中采用了從綠咖啡豆中提取的α-半乳糖苷酶,能夠快速水解棉籽糖,但是對(duì)水蘇糖和毛蕊草糖的作用非常緩慢,而且在定的孵育條件下不能*水解低聚糖。而Megazyme試劑盒采用來(lái)自黑曲霉的酶,能夠*并快速的催化棉籽糖、水蘇糖和毛蕊草糖水解為D-葡萄糖和蔗糖。
2.檢測(cè)原理
在α-半乳糖苷酶和轉(zhuǎn)化酶的作用下,半乳糖基蔗糖水解為D-葡萄糖、D-半乳糖和D-果糖。然后使用葡萄糖氧化酶/過(guò)氧化物酶試劑測(cè)定D-葡萄糖。該方法無(wú)法區(qū)分棉籽糖、水蘇糖和毛蕊草糖,但是可以作為一個(gè)整體檢測(cè)。1摩爾棉籽糖含有1摩爾D-葡萄糖,濃度以摩爾表示。同時(shí)測(cè)定樣品提取物中的游離蔗糖和D-葡萄糖。